關(guān)于全自動(dòng)生化分析儀,你想知道的全在這里!
發(fā)布日期:2023/4/28 14:28:14
1、全自動(dòng)生化分析儀有那些模塊組成 ?
光學(xué)系統(tǒng):老式的ACA系統(tǒng)采用鹵鎢燈、透鏡、濾色片、光電池組件。
新式ACA系統(tǒng)光學(xué)部分有很大的改進(jìn),ACA的分光系統(tǒng)因其光位置不同有前分光和后分光之分,先進(jìn)的光學(xué)組件在光源與比色杯之間使用了一組透鏡,將原始光源燈投射出的光通過比色杯將光束變成光速(這與傳統(tǒng)的契型光束不同),這樣,即使比色杯再小,點(diǎn)光束也能通過。與傳統(tǒng)方法相比,能節(jié)約試劑消耗40-60%。
點(diǎn)光束通過比色杯后,在經(jīng)這一組還原透鏡(廣差糾正系統(tǒng)),將點(diǎn)光束還原成原始光束,在經(jīng)光柵分成固定的若干種波長(zhǎng)(約10種以上波長(zhǎng))。
采用光/數(shù)碼信號(hào)直接轉(zhuǎn)換技術(shù)即將光路中的光信號(hào)直接變成數(shù)碼信號(hào)。將電磁波對(duì)信號(hào)的干擾及信號(hào)傳遞過程中的衰減完全消除。
同時(shí),在信號(hào)傳輸過程中采用光導(dǎo)纖維,使信號(hào)達(dá)到無衰減,測(cè)試精度提高近100倍。光路系統(tǒng)的封閉組合,又使得光路無需任何保養(yǎng),且分光準(zhǔn)確、壽命長(zhǎng)。
恒溫系統(tǒng):由于生物化學(xué)反應(yīng)時(shí)溫度對(duì)反應(yīng)結(jié)果影響很大,故恒溫系統(tǒng)的靈敏度、準(zhǔn)確度直接影響測(cè)量結(jié)果。
早期的生化儀器采用空氣浴的方法,后來發(fā)展到集干式空氣浴與水浴優(yōu)點(diǎn)于一身的恒溫液循環(huán)間接加溫干式浴。
其原理是在比色杯周圍設(shè)計(jì)一恒溫槽,在槽內(nèi)加入一種無味、無污染、不蒸發(fā)、不變質(zhì)的穩(wěn)定恒溫液,恒溫液的容量大,熱穩(wěn)定性好、均勻。在比色杯不直接接觸恒溫液,克服了水浴式恒溫易受污染和空氣浴不均勻、不穩(wěn)定的特點(diǎn)。
樣品反應(yīng)攪拌技術(shù)和探針技術(shù):傳統(tǒng)的反應(yīng)攪拌技術(shù)采用磁珠式和渦旋攪拌式兩種。
現(xiàn)在流行的攪拌技術(shù)是模仿手工清洗過程的多組攪拌棒組成的攪拌單元,當(dāng)?shù)谝唤M攪拌棒在攪拌樣品/試劑或混合溶液時(shí),第二組攪拌棒同時(shí)進(jìn)行高速高效的清洗,第三組攪拌棒也同時(shí)進(jìn)行溫水清洗和風(fēng)干過程。
在單個(gè)攪拌棒的設(shè)計(jì)上,采用新型螺旋型高速旋轉(zhuǎn)攪拌,旋轉(zhuǎn)方向與螺旋方向相反,從而增加了攪拌的力度,被攪拌液不起泡,減少微泡對(duì)光的散射。
試劑及樣品探針依照早期電容式傳感的原理,但略加改進(jìn),增加了血凝塊和蛋白質(zhì)凝塊的報(bào)警,依照?qǐng)?bào)警級(jí)別的重測(cè)結(jié)果,減少吸樣誤差,提高測(cè)試結(jié)果的可靠性。
大型生化儀器每小時(shí)檢測(cè)數(shù)多在1000個(gè)以上,因此自動(dòng)重測(cè)相當(dāng)重要,測(cè)試結(jié)果的主觀評(píng)價(jià)和手工重測(cè)已不能滿足臨床的需要。
其他方面:試劑、樣品的條形碼識(shí)別和計(jì)算機(jī)登錄,早期生化儀器由于缺乏條碼識(shí)別功能,出現(xiàn)錯(cuò)誤機(jī)會(huì)較多。近幾年無論進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)生化儀器均采用條碼檢測(cè),這項(xiàng)技術(shù)在生化儀器上的使用給高速ACA的研制提供了技術(shù)支持,也使得儀器相當(dāng)支持。軟件的開發(fā)簡(jiǎn)單易行,因此,條碼檢測(cè)是儀器智能化的基礎(chǔ)。開放式試劑,作為醫(yī)院選擇機(jī)型的一項(xiàng)重要因素,儀器是否支持開放式試劑非常重要。試劑開放后,醫(yī)院、科研單位可自主選擇試劑供應(yīng)商,在衡量?jī)r(jià)格、低度器結(jié)果的可靠性、試劑有效期等方面有了較大的自由度。離子選擇電極分析附件(ISE)、人體血清和尿液電解質(zhì)指標(biāo)相當(dāng)重要,ACA系統(tǒng)附帶ISE后,醫(yī)院可節(jié)省費(fèi)用。
2、全自動(dòng)生化分析儀原理有那些?
全自動(dòng)生化分析儀就是將原始手工操作過程中的取樣、混勻、溫?。?7℃)檢測(cè)、結(jié)果計(jì)算、判斷、顯示和打印結(jié)果及清洗等步驟全部或者部分自動(dòng)運(yùn)行。
如今,生化檢驗(yàn)基本上都實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化分析,還有專為大型或超大型臨床實(shí)驗(yàn)室和商業(yè)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的全自動(dòng)生化分析系統(tǒng),可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)量任意配置。
無論是當(dāng)今運(yùn)行速度最快(9800Test/h)的模塊式全自生化分析儀,還是原始手工操作用于比色的光電比色計(jì),其原理都是運(yùn)用了光譜技術(shù)中吸收光譜法。是生化儀最基本核心。
雙波長(zhǎng)檢測(cè)原理的作用:
1. 消除噪音干擾。
2. 減少雜散光影響。
3. 減少樣品本身光吸收的干擾:當(dāng)樣品中存在非化學(xué)反應(yīng)的干擾物如甘油三酯、血紅蛋白、膽紅素等時(shí),會(huì)產(chǎn)生非特異性的光吸收,雙波長(zhǎng)方式可以部分消除這類光吸收干擾。
3、其他方面問題。
為什么干擾物主波長(zhǎng)和次波長(zhǎng)越臨近越好?
雙波長(zhǎng)設(shè)置的情況是,干擾物的光一般會(huì)出現(xiàn)光散射和非特異性光吸收,就需要設(shè)置主波長(zhǎng)和副波長(zhǎng),主波長(zhǎng)就是待測(cè)物質(zhì)特征吸收峰處。副波長(zhǎng)設(shè)置的原則是干擾物在主波長(zhǎng)的吸收與副波長(zhǎng)吸光率越接近越好,如己糖激酶法測(cè)血糖,340nm作為主波長(zhǎng),380nm為副波長(zhǎng),血清蛋白在340nm和380nm處具有幾乎同等的吸收峰,因此能消除血紅蛋白的干擾。所以干擾物主波長(zhǎng)和次波長(zhǎng)越臨近越好。
測(cè)定要求
1. 樣品:血清、尿液、腦脊液等。
2. 試劑:?jiǎn)卧噭?、雙試劑
3. 雙波長(zhǎng):由主波長(zhǎng)和副波長(zhǎng)構(gòu)成的兩個(gè)波長(zhǎng)??梢韵跈z測(cè)過程中的干擾。
4. 校準(zhǔn)品(標(biāo)準(zhǔn)):比對(duì)未知樣品的濃度
5. 質(zhì)控品:用于生化儀在日常工作中對(duì)儀器、試劑等方面狀態(tài)的監(jiān)控。
方法
1. 終點(diǎn)法(endessay)完全被轉(zhuǎn)化成產(chǎn)物,不再進(jìn)行反應(yīng)達(dá)到終點(diǎn),取反應(yīng)終點(diǎn)的吸光度來計(jì)算被測(cè)物質(zhì)的濃度。生化檢驗(yàn)中除酶和BUN、CRE外幾乎都用終點(diǎn)法來進(jìn)行檢測(cè)。
1)一點(diǎn)終點(diǎn)法:取反應(yīng)達(dá)終點(diǎn)時(shí)的一個(gè)點(diǎn)的吸光度來計(jì)算結(jié)果。
2)二點(diǎn)終點(diǎn)法:取反應(yīng)尚未開始時(shí)讀取一個(gè)點(diǎn)的吸光度,待反應(yīng)達(dá)終點(diǎn)時(shí)再取第二點(diǎn)的吸光度。用第二點(diǎn)吸光度減去第一點(diǎn)吸光度的差值來計(jì)算結(jié)果。主要用于扣除試劑和樣品空白。保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。一般雙試劑用。
2. 固定時(shí)間法(兩點(diǎn)法):是取尚在反應(yīng)中的兩點(diǎn)間的差值來計(jì)算結(jié)果。此兩點(diǎn)既不是反應(yīng)起始點(diǎn)也不是終點(diǎn)。主要用于檢測(cè)一些非特異性的項(xiàng)目,如肌酐。
3. 連續(xù)監(jiān)測(cè)法(動(dòng)力學(xué)法、速率法):是在測(cè)定酶的活性或酶代謝產(chǎn)物時(shí),連續(xù)取反應(yīng)曲線中呈線性變化吸光度值(△;A/min)來計(jì)算結(jié)果。因在反應(yīng)線性時(shí)間內(nèi)各點(diǎn)間的吸光度差值為零故又稱謂零級(jí)反應(yīng)。
試劑問題
混成單一:比如酶法肌酐試劑,第一步R1中的酶要消除樣品中內(nèi)源性肌酸的干擾,如果混成單一試劑,則會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏高,消除法HDL、LDL也不能混成單一試劑,因?yàn)樗鼈兌家謩e清除HDL和LDL以外的脂蛋白,從而達(dá)到檢測(cè)的目的,如果混成單一試劑,則會(huì)使測(cè)定的HDL和LDL不準(zhǔn)確。
另外,有的試劑混成單一試劑后,穩(wěn)定性和抗干擾能力也會(huì)明顯下降。
解決辦法:
①在儀器通道或試劑位允許的情況下盡量使用雙試劑;
②如一定要使用單一試劑,最好選擇試劑廠家針對(duì)部份項(xiàng)目專門生產(chǎn)好的單一試劑。
開瓶:隨著全自動(dòng)生化分析儀的普及,“開瓶穩(wěn)定性”也隨之受到了大家的重視,但是就目前有的試劑方法學(xué)來講,還達(dá)不到人們所要求的試劑開瓶后在儀器內(nèi)放很長(zhǎng)時(shí)間不需要定標(biāo),比如ALP、TP、GSP等PH為堿性的試劑,開瓶后試劑會(huì)吸收空氣中的二氧化碳,使試劑本身的PH值下降。
如果長(zhǎng)時(shí)間開瓶不定標(biāo)或校準(zhǔn),會(huì)使檢測(cè)結(jié)果發(fā)生偏離,在國(guó)外有的項(xiàng)目有明文規(guī)定,必須72小時(shí)之內(nèi)定標(biāo),比如BUN。
但是在國(guó)內(nèi)的某些實(shí)驗(yàn)室為了方便,很長(zhǎng)時(shí)間都不作校準(zhǔn),導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果的不準(zhǔn)確。解決辦法:了解試劑的特性,及時(shí)對(duì)部份項(xiàng)目進(jìn)行校準(zhǔn),對(duì)于每天標(biāo)本量不多的醫(yī)院,可按1~2天的用量取用試劑放入儀器。
相混:將不同批號(hào)的試劑混合在一起使用的現(xiàn)象在檢驗(yàn)中經(jīng)常發(fā)生,當(dāng)然這一方面是為了節(jié)省成本,另一方面為了方便。
但是不管是什么品牌、什么試劑,由于不同批號(hào)的試劑生產(chǎn)時(shí)間不同,試劑中工具酶的活性會(huì)有差異,會(huì)發(fā)生水解的底物濃度隨時(shí)間長(zhǎng)短也會(huì)不同。因此混在一起使用而又不定標(biāo),可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的不準(zhǔn)確。還有如果有的試劑開瓶時(shí)間太長(zhǎng),空氣中的灰塵或細(xì)菌會(huì)進(jìn)入瓶中,由于有的試劑含有大量的蛋白質(zhì)和鹽,是細(xì)菌生長(zhǎng)的最好條件,雖然有的試劑添加了防腐劑,但防腐劑的防腐也是有一定限度的,而且絕大多數(shù)廠家的試劑中是沒有加防霉劑的。
解決辦法:
① 不同批號(hào)試劑建議不要混用,如果混用最好重新定標(biāo);
②試劑瓶在儀器內(nèi)使用時(shí)間不要過長(zhǎng),及時(shí)更換;
③一般每個(gè)試劑瓶?jī)?nèi)由于試劑針不能吸完,或多或少都會(huì)留有幾毫升的試劑,如果是同一批號(hào)可以將未開瓶的同一批號(hào)試劑往里倒。但如果不是同一批號(hào)的試劑時(shí)倒人后最好定標(biāo),最好的做法是將每個(gè)批號(hào)的剩余試劑留起來待一定數(shù)量后混在一起,然后重新定標(biāo)后檢測(cè)。
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